ELISA（酶聯(lián)免疫試驗(yàn)）以其靈敏度較高、特異性好的特點(diǎn)已廣泛用于科研實(shí)驗(yàn)及臨床，越來越多科研單位選擇用ELISA實(shí)驗(yàn)方法完成研究課題，所以，ELISA就有較大的科研前景。實(shí)驗(yàn)的*步就是要準(zhǔn)備好樣本，樣本的收集跟保存聽上去貌似很簡(jiǎn)單，但不乏有許多客戶是因?yàn)闃颖镜氖占４鏇]做好而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司作為專業(yè)的ELISA試劑盒廠家必須對(duì)影響ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果各因素有一定的認(rèn)識(shí)。才能為客戶提供zui的服務(wù)。的試劑 、好的儀器和正確的操作是保證ELISA試劑盒檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。
下面就樣本收集跟保存兩點(diǎn)恒遠(yuǎn)生物提幾個(gè)建議：
1.嚴(yán)重溶血，以HRP 為標(biāo)記的ELISA 測(cè)定中，殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性，催化底物顯色造成假陽性；
2.混有紅細(xì)胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈；如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng)：
3.標(biāo)本凝固不全 ，有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè)，常在血液還未開始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清，使血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA測(cè)定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊，易造成假陽性結(jié)果；
4.采血試管洗滌不* 、反復(fù)使用易交叉污染：塑料試管能吸附抗原物質(zhì)，樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。
血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)，嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。一般說來，在 5 天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過長(zhǎng)導(dǎo)致血清IgG 聚合，使間接法的 試劑 本底加深。超過一周測(cè)定的需－20℃保存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡?；鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測(cè)。反復(fù)凍融會(huì)使 抗體 效價(jià)跌落，所以測(cè) 抗體 的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè)，宜少量分裝冰存；使用一次性玻璃試管或真空管采血管；并使用非抗凝標(biāo)本，肝素抗凝血漿會(huì)增加OD值，可能與高濃度肝素具有強(qiáng)大的負(fù)電荷能吸附酶標(biāo)記物不易洗脫有關(guān)；EDTA、酶抑制劑（如NaN3）可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性；血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清，或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?/span>
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